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CD28 ( Cluster of Differentiation 28) 表达在T细胞上,是T细胞激活与存活的共刺激信号。CD28和TCR共激活的T细胞具有表达多个细胞因子的能力(尤其是IL-6)。

B-hCD28人源化小鼠


基本信息


正规命名

   C57BL/6-Cd28tm1(hCD28)/Bcgen

普通命名

     B-hCD28 mice

小鼠背景

   C57BL/6

产品编号

     B-CM-019

雄鼠货号

   BCM019M

雌鼠货号

     BCM019F

相关基因

   Cd28 (CD28 antigen)


CD28基因功能简介


CD28 ( Cluster of Differentiation 28) 表达在T细胞上,是T细胞激活与存活的共刺激信号。CD28和TCR共激活的T细胞具有表达多个细胞因子的能力(尤其是IL-6)。CD28是唯一组成性表达在naïve T细胞上的B7家族受体(包括B7.1(CD80)和B7.2(CD86))。TCR和MHC:抗原复合体结合后,倘若没有CD28:B7共刺激信号,T细胞是无活力的(anergic)。成熟的T细胞表达CTLA-4,和CD28竞争性结合B7,抑制T细胞过度激活。CD28激动剂可激活T细胞,促进免疫反应,目前激动剂的应用研究在临床II期。



基因编辑策略



CD28.png


表型分析

mRNA表达分析


mRNA分析.png


图1. B-hCD28人源化小鼠的RT-PCR分析在B-hCD28杂合鼠脾细胞里,可检测到hCD28 mRNA表达。


B-hCD28蛋白表达分析(杂合鼠)

image.png

图2. B-hCD28人源化小鼠脾细胞活化及流式检测

结果显示:在C57BL/6小鼠和B-hCD28杂合鼠活化T细胞里,均可检测到mCD28+细胞。

在B-hCD28杂合鼠活化T细胞里,可检测到hCD28+细胞。


B-hCD28蛋白表达分析(纯合鼠)

image.png


图3.B-hCD28人源化小鼠脾细胞活化及流式检测

结果显示:在C57BL/6小鼠中可检测到mCD28+细胞。在B-hCD28纯合鼠中,可检测到hCD28+细胞。



 B-hCD28模型验证
——免疫后小鼠抗体效价比较


image.png


图4. 利用hPDL1-his重组蛋白与CFA乳化后免疫C57BL/6和B-hCD28小鼠。

14天后检测免疫后小鼠血清中IgG1,IgG2a, IgG2b各亚型特异性抗体效价。检测结果无显著差异,说明hCD28小鼠B7-1/CD28共刺激信号途径正常,嵌合CD28分子具有正常生物学活性。


B-hCD28模型验证
——
小鼠细胞因子表达分析

image.png

图5. 细胞因子检测

利用CD和CD28抗体对C57BL/6、B-hCD28杂合小鼠和 B-hCD28纯合小鼠进行刺激,之后取血进行INFγ和IL-2细胞因子的检测。

结果显示商业化人CD28抗体(hCD28-9.3和hCD28.2)能够激活纯合B-hCD28小鼠免疫系统产生细胞因子,CD28信号途径正常,嵌合CD28分子具有正常生物学活性。


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