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全基因敲除(Conventional Knockout)小鼠模型


指利用同源重组技术,将目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或功能域用一段外源DNA序列替代,获得在整个发育时期(从单细胞胚胎期到成年期)的全身所有组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。

 全基因敲除(Conventional Knockout)小鼠模型


1.概念

指利用同源重组技术,将目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或功能域用一段外源DNA序列替代,获得在整个发育时期(从单细胞胚胎期到成年期)的全身所有组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。

 

2.优缺点

优点:打靶策略的设计及打靶载体构建简单;

缺点:目的基因的敲除可能引起胚胎致死或导致其他基因的表达失调。如果预测存在这种风险,可以使用条件性基因敲除设计策略。

 

3.原理

常规基因敲除策略是以筛选基因新霉素(Neo)取代目的基因的一个或多个外显子来实现目的基因的敲除。该基因敲除发生在全身所有的细胞及组织中,可能存在胚胎致死风险,条件性基因敲除策略能够规避这一风险。

打靶策略如下图:

改.jpg

 

 

4.应用

研究某个基因在全身水平上的生理或病理功能;

药物的靶标确认;

药物的毒理学研究

 

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