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报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型

指在目的基因的位置引入报告基因(如EGFP、mRFP、mCherry、mYFP或LacZ等)或标记基因的小鼠模型,通过报告基因的表达监控目的基因启动子的转录活性、监控目的蛋白的表达定位及细胞转运。


报告基因(Reporter/Tag)小鼠模型


1.概念

指在目的基因的位置引入报告基因(如EGFP、mRFP、mCherry、mYFP或LacZ等)或标记基因的小鼠模型,通过报告基因的表达监控目的基因启动子的转录活性、监控目的蛋白的表达定位及细胞转运。


2.优缺点

优点:报告基因小鼠模型是一种在体研究启动子转录活性、蛋白表达定位或细胞转运的有力工具。

缺点:在目的基因的启动子后、编码序列前引入报告基因的同时会敲除目的基因。如果不想敲除目的基因,可以使用IRES或2A技术,共表达目的基因和报告基因。


3.原理

如果使用报告基因小鼠是为了监控基因启动子的转录活性,可以用报告基因的编码序列(如EGFP)替换目的基因的编码序列,在引入报告基因的同时敲除目的基因。

如果使用报告基因小鼠是为了监控蛋白表达、定位及细胞转运,一种实现方法就是在目的基因的蛋白编码区末端加入一个短肽编码序列来标记蛋白。通过短肽抗体对短肽的识别,间接研究目的蛋白的表达及功能,这一方法尤其适用于没有抗体的目的蛋白。


4.应用

基因启动子的转录活性研究;

在体监控蛋白的表达、定位或细胞转运;

药物的靶标确认;

药物的临床前评价。


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