北京百奥赛图基因生物技术有限公司

基因编辑

>基因编辑细胞系模型定制

 肿瘤细胞系模型定制服务


服务编号:GE0301


服务说明


基因编辑类型 细胞操作难度c
交付内容 交付标准 赠送服务 可选服务h 交付时间 价格 
敲除

2个阳性克隆;

2管冻存细胞/阳性克隆d

1管阴性对照细胞;
结题报告;
课题汇报(每三周1次)
   

PCR;
sanger测序;
支原体阴性
e
阳性克隆冻存保种半年f
抗性基因去除 g
流式细胞术检测;
Luciferase表达检测;
Reverse transcription (RT)-PCR检测基因敲除;
细胞系建库;
细胞生长曲线
   
13-16周询价
16-19周
19-22周
敲进a A/B 13-16周
16-19周
点突变b A/B 16-19周
22-26周

a.   对于敲进,默认提供单等位基因位点敲进,可根据改造要求提供全等位基因敲进(可能增加费用和周期),具体情况需

      要综合评估敲进要求和细胞系打靶难度,请联系我们。

b.   对于点突变项目,默认提供全等位基因点突变,并根据细胞系操作难度和核型情况决定是否能够用于基因编辑。可

      根据需要提供单等位基因点突变。

c.   根据我们建立的细胞系档案,综合细胞系操作难度进行分类:A:正常;B:有难度;C:较难;对于客户提供的细

      系(需要您提供“细胞系模型定制信息表”),我们会先进行抗生素敏感性、电转条件、克隆形成、培养条件和核

      型等预实验并判定改造难度以提供报价和周期依据。

d.   可根据要求提供更多阳性克隆(可能增加费用和周期);冻存克隆经过复苏活性检测,保证克隆复苏活力。

e.   对于使用我们保有的细胞系,提供支原体检测报告。不承接支原体污染的细胞基因编辑项目。。

f.    可根据要求增加保种时间(可能增加费用)

g.   根据需要可提供抗性基因(Cre/loxP系统和Piggybac系统)去除服务,避免抗性基因的存在可能对基因表达、科研实

      验的影响;Piggybac系统可以实现 “无痕”基因编辑。制备周期增加3-8周时间。

h.   根据您的课题需求,我们可以为您提供进一步的服务,具体请联系我们。

 

服务流程




会诊1_副本.jpg


案例

 

    EGE技术基因敲入细胞系

 

    百奥赛图利用EGE技术,成功制备了在ACTB(细胞骨架丝状蛋白)基因编码框翻译起始位点敲进EGFP(融合蛋白)的U2OS细胞系,以及在LMNB1(核膜蛋白)基因编码框起始位点敲进EGFP(融合蛋白)的大鼠C6细胞系。

  

平台优势 :


    高速度:最快2-3个月得到阳性单克隆细胞系

    零风险:强大的细胞基因编辑平台,课题失败全额退款

    高效率: 利用EGE技术,比传统的CRISPR/Cas9介导基因重组技术效率提高20倍

    更安全:与病毒感染相比安全性更高

    经验丰富:已经完成数百个EGE细胞系课题的制备经验

    细胞来源可靠:野生型细胞系来源于ATCC

  

打靶载体设计及荧光检测结果:

 

    利用流式细胞术分析重组效率发现,在U2OS细胞系中,CRISPR/Cas9介导的EGFP-ACTB基因敲进效率只有1.91%,而EGE可以达到15.02%,提高了约8倍。在C6细胞系中,EGE技术将EGFP-LMNB1的敲进效率从0.19%提升至3.6%,提高了约19倍。

 

 EGE.png

1. ACTB 基因编码β-ACTIN蛋白,它是一种细胞骨架蛋白。打靶载体同源臂约为1kb,分别利用CRISPR/Cas9和EGE技术介导打靶载体的同源重组。

2. LMNB1基因编码核蛋白Lamin-B1。打靶载体同源臂约为1kb,分别利用CRISPR/Cas9和和EGE技术介导同源重组。

 

 


订购咨询

    邮箱:info@bbctg.com.cn

    电话:010-56315318

 

 

 

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