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Tol2系统转基因服务

2017-07-28 16:26:59.0

1.技术简介

Tol2转座子由于最早是从鱼类中发现的,在斑马鱼的研究中应用已经非常广泛,并且有很高的转基因效率,之后发现在除了斑马鱼以外的其他非脊椎动物中也有非常高的转座效率,在小鼠和人的细胞系中的应用已经有广泛的报道,与以往在小鼠中常用的转座子Sleeping Beauty和PiggyBac相比,Tol2的转座效率甚至更高。多种细胞系和动物实验表明,Tol2系统介导的转基因没有明显的插入位点特异性。插入片段的大小基本不会影响Tol2系统的正常作用,我公司利用Tol2系统在小鼠上进行了13kb片段的转基因,且得到了较高的转基因效率。同时我们成功将该系统应用到转基因大鼠和稳定基因表达细胞系构建中。 因此Tol2系统成为构建转基因动物模型和细胞系的强有力工具。

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2.Tol2 转基因系统的优势 

• 更高的转基因效率
• 无明显的插入位点倾向性
• 可携带大片段外源DNA--已成功转入13kb片断


3.Tol2 转基因系统应用

3.1.简单、高效建立稳定基因表达细胞系 

与质粒转染,药物抗性筛选建立稳定表达细胞株相比,Tol2系统简单、成功率高、周期短。 与病毒系统相比,操作实验简单、费用低廉。

3.2.转基因大、小鼠的制备

与传统DNA原核注射相比,Tol2系统采用胞浆注射,操作简单,成功率高。尤其是克服了传 统DNA原核注射制备转基因大鼠成功率低的问题。 

4.服务类型

服务类型

质控方式产品形式
转基因细胞系两对引物PCR基因型检测冻存细胞
转基因小鼠两对引物PCR基因型检测F0代小鼠
转基因大鼠两对引物PCR基因型检测F0代大鼠


5.制备转基因细胞系不同方式的差异比较

制备方式效率制备方式稳定性
DNA直接转染法低(~5%),周期长简单,DNA直接转染不稳定
Tol2转座子法高(~20%),周期短简单,一次克隆,与转座酶共转染稳定
逆转录病毒法高(~100%)制备复杂,需进行病毒包装和分离稳定



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